Биуретовый тест для определения концентрации белка: всестороннее руководство
Формула: Биуретовый-тест---это-химический-анализ,-который-выявляет-наличие-белка-в-образце.-Он-широко-используется-в-биологических-и-химических-лабораториях-для-точного-измерения-концентрации-белка.-С-его-характерной-пурпурной-окраской,-биуретовый-тест-предлагает-визуально-убедительный-способ-измерения-уровня-белка.-В-этой-статье-рассматриваются-сложности-биуретового-теста,-формула,-используемая-для-расчета-концентрации-белка,-и-практические-применения. Биуретовый-тест-основан-на-колориметрической-реакции,-в-которой-белок-взаимодействует-с-ионами-меди-в-щелочном-растворе-с-образованием-фиолетового-комплекса.-Эта-реакция-облегчается-наличием-пептидных-связей,-что-делает-ее-специфичной-для-белков.-Интенсивность-образованного-цвета-прямо-пропорциональна-концентрации-белка-в-образце. Для-расчета-концентрации-белка-вам-нужны-два-критических-входных-параметра:-концентрация-белка-в-образце-и-объем-образца.-Следующая-формула-суммирует-это-отношение: Убедитесь,-что-все-входные-значения-больше-нуля: Представьте,-что-вы-работаете-в-лаборатории-и-вам-нужно-определить-концентрацию-белка-в-образце-раствора.-Вы-измеряете-концентрацию-с-помощью-спектрофотометра-и-обнаруживаете,-что-она-составляет-5-мг/мл.-Затем-вы-отмеряете-6-мл-этого-раствора.-Используя-нашу-формулу,-вы-вычисляете-общее-содержание-белка: Общее-содержание-белка-в-вашем-образце-составляет-30-мг. Биуретовый-реагент-обычно-содержит-сульфат-меди,-гидроксид-натрия-и-тартрат-натрия-калия.-Ионы-меди-взаимодействуют-с-пептидными-связями-в-белках,-образуя-характерный-фиолетовый-цвет. Нет,-биуретовый-тест-специфичен-для-белков-из-за-своей-зависимости-от-пептидных-связей.-Он-не-может-выявлять-углеводы,-липиды-или-нуклеиновые-кислоты. Да,-биуретовый-тест-количественный.-Интенсивность-образованного-фиолетового-цвета-прямо-пропорциональна-концентрации-белка,-что-позволяет-точно-измерить-количество-белка. Хотя-биуретовый-тест-надежен-для-большинства-белковых-образцов,-он-требует-относительно-большого-объема-образца.-Кроме-того,-он-может-неэффективно-обнаруживать-очень-низкие-концентрации-белка. Биуретовый-тест---мощный-и-надежный-метод-для-определения-концентрации-белка-в-образце.-Поняв-основную-химию-и-применив-формулу-(proteinConcentration,-sampleVolume)-=>-proteinConcentration-*-sampleVolumeПонимание-биуретового-теста-и-концентрации-белка
Химия-биуретового-теста
Формула-для-расчета-концентрации-белка
(proteinConcentration,-sampleVolume)-=>-proteinConcentration-*-sampleVolumeИспользование-параметров:
proteinConcentration---Концентрация-белка-в-образце-(измеряется-в-мг/мл).sampleVolume---Объем-образца-(измеряется-в-мл).Пример-допустимых-значений:
proteinConcentration-=-2.5-мг/млsampleVolume-=-10-млВыходные-данные:
result-=-Общее-количество-белка-(измеряется-в-мг).Проверка-данных
proteinConcentration-или-sampleVolume-меньше-или-равно-нулю,-выдайте-сообщение-об-ошибке:-'Значения-должны-быть-больше-нуля.'Практический-пример
(5,-6)-=>-5-*-6-=-30-мг
Часто-задаваемые-вопросы-(FAQ)
Из-чего-состоит-биуретовый-реагент?
Может-ли-биуретовый-тест-обнаружить-другие-биомолекулы?
Является-ли-биуретовый-тест-количественным?
Есть-ли-ограничения-у-биуретового-теста?
Резюме
(proteinConcentration,-sampleVolume) => proteinConcentration * sampleVolume, вы сможете точно измерить уровень белка в ваших экспериментах. Не забывайте проверять входные значения и убеждаться, что они больше нуля для точных результатов.