ブラッドフォードタンパク質アッセイ方程式の理解：包括的ガイド
式:- ブラッドフォードタンパク質アッセイは、溶液中のタンパク質濃度を測定するための迅速で正確な分光分析手法です。以下にその内訳を示します: サンプル溶液があり、それを分光光度計に入れました。595 nmでの吸光度が0.5、ブランクの吸光度が0.1として記録された場合、BSA標準曲線からの勾配（k）が吸光度単位あたり0.2 mg/mLです。これを式に代入すると、タンパク質濃度 ブラッドフォードアッセイには既知の線形範囲（通常は1〜100 µg/mLのタンパク質）があります。この範囲を超えると精度が低下し、結果が不正確になる可能性があります。つまり、勾配kを正確に決定するには、標準タンパク質（例えばウシ血清アルブミン（BSA））を使用して制御された設定で行う必要があります。 正確な結果を得るには、すべての値が適切な範囲内にあることが重要です。595 nm以外の波長を使用するなどの偏差は、結果を大きく歪める可能性があります。 ブラッドフォードタンパク質アッセイ方程式は、溶液中のタンパク質濃度を決定するための生化学における非常に重要なツールです。重要な要素としては、正確な標準曲線生成と正確な吸光度測定が含まれます。Cbradford-=-(A595---Ablank)-/-kブラッドフォードタンパク質アッセイ方程式の理解
Cbradford-はタンパク質の濃度-(mg/mL)-です。A595-は595-nmでのサンプルの吸光度読み取り値です。Ablank-はブランク（タンパク質なし）の吸光度読み取り値です。k-は標準曲線から得られた勾配-(mg/(mL-*-吸光度))-です。パラメータの利用: 例と解釈
Cbradfordは以下のように計算されます:Cbradford = (0.5 0.1) / 0.2 = 2 mg/mL出力:
Cbradford = mg/mL単位のタンパク質濃度線形範囲と精度
データの検証および実験条件
A595 サンプルを挿入する前に分光光度計をゼロに設定する必要があります。よくある質問 (FAQs)
A: 洗剤や高濃度の還元剤はアッセイに干渉する可能性があります。正確な測定を行うために適切なコントロールを含める必要があります。
A: 信頼性を高めるために、アッセイを実行するたびに新しい標準曲線を生成してください。概要