प्रोटीन की सटीक मात्रा के लिए ब्रैडफोर्ड प्रोटीन जांच गणना में महारत हासिल करना
सूत्र: ब्रैडफोर्ड-प्रोटीन-परीक्षण-समाधान-में-प्रोटीन-की-सांद्रता-निर्धारित-करने-की-एक-त्वरित-और-सटीक-विधि-है।-यह-तकनीक-प्रोटीन-से-कोमासी-ब्रिलिएंट-ब्लू-रंग-बाइंडिंग-पर-आधारित-है,-जिससे-रंग-में-परिवर्तन-होता-है-जिसे-स्पेक्ट्रोफोटोमीटर-का-उपयोग-करके-मापा-जा-सकता-है।-रंग-परिवर्तन-की-डिग्री-सीधे-प्रोटीन-सांद्रता-के-अनुपात-में-होती-है। प्रोटीन-सांद्रता-की-गणना-के-लिए-उपयोग-किया-जाने-वाला-सूत्र-है: परिणाम,-प्रोटीन-सांद्रता,-माइक्रोग्राम-प्रति-मिलीलीटर-(µg/mL)-में-व्यक्त-किया-जाता-है। आइए-देखें-कि-वास्तव-में-गणना-कैसे-काम-करती-है: सूत्र-का-उपयोग-करते-हुए,-हम-प्रोटीन-सांद्रता-की-गणना-कर-सकते-हैं: यह-परिणामी-मान-है: मान-लें-कि-एक-शोध-प्रयोगशाला-में-वैज्ञानिक-विभिन्न-सेल-लाइसटे-में-प्रोटीन-की-मात्रा-को-मापने-का-कार्य-कर-रहे-हैं।-उन्होंने-एक-ब्रैडफोर्ड-प्रोटीन-परीक्षण-किया-और-अपने-एक-नमूने-का-अवशोषण-0.65-पाया।-पिछले-प्रयोगों-से,-उन्हें-पता-है-कि-अवरोधक-0.08-और-ढाल-1.4-है।-इन-मानों-को-हमारे-सूत्र-में-डालते-हुए: यह-परिणामी-मान-है: यह-त्वरित-और-सटीक-माप-शोधकर्ताओं-को-अपने-प्रयोगों-को-आगे-बढ़ाने-में-मदद-करता-है,-यह-सुनिश्चित-करते-हुए-कि-वे-सही-प्रोटीन-सांद्रता-के-साथ-काम-कर-रहे-हैं। ब्रैडफोर्ड-प्रोटीन-परीक्षण-करते-समय-कुछ-सामान्य-समस्याएं-आ-सकती-हैं: उत्तर:-अपने-नमूने-को-पतला-करें-ताकि-उसका-अवशोषण-मान-मानक-वक्र-की-सीमा-के-भीतर-हो-जाए-फिर-सांद्रता-को-पुनः-गणना-करें। उत्तर:-ब्रैडफोर्ड-प्रोटीन-परीक्षण-विशेष-रूप-से-595-एनएम-पर-अवशोषण-को-मापने-के-लिए-डिज़ाइन-किया-गया-है।-एक-अलग-तरंग-दैर्ध्य-का-उपयोग-करने-से-गलत-परिणाम आ सकते हैं। उत्तर: हर बार परीक्षण करते समय ताजे मानक तैयार करें और उन्हें सटीक रूप से मापें। एकाधिक पुनरावृत्तियों का उपयोग करें और परिणामों का औसत निकालें।प्रोटीन-सांद्रता-=-(अवशोषण---अवरोधक)-/-ढालब्रैडफोर्ड-प्रोटीन-परीक्षण-की-गणना-का-परिचय
सूत्र-को-समझना
प्रोटीन-सांद्रता-=-(अवशोषण---अवरोधक)-/-ढालउदाहरण-गणना
अवशोषण-=-0.75अवरोधक-=-0.1ढाल-=-1.5प्रोटीन-सांद्रता-=-(0.75---0.1)-/-1.5प्रोटीन-सांद्रता-=-0.43-µg/mL.वास्तविक-जीवन-उदाहरण
प्रोटीन-सांद्रता-=-(0.65---0.08)-/-1.4प्रोटीन-सांद्रता-=-0.41-µg/mL.सामान्य-समस्याएं-और-त्रुटियों-का-निवारण
अक्सर-पूछे-जाने-वाले-प्रश्न-(एफएक्यू)
प्रश्न:-अगर-मेरे-अवशोषण-मान-मानक-वक्र-की-सीमा-से-बाहर-हैं-तो-क्या-होगा?
प्रश्न:-क्या-मैं-ब्रैडफोर्ड-परीक्षण-के-लिए-अलग-तरंग-दैर्ध्य-का-उपयोग-कर-सकता-हूँ?
प्रश्न: मैं अपने मानक वक्र की सटीकता कैसे सुनिश्चित करूं?